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9-5
先說說柱子能不能反沖的問題,色譜柱到底能不能反沖?如果色譜柱兩端的篩板孔徑相同反沖是不會(huì)有什么問題的,從填料流失的角度來說,粒徑為5um,而篩板孔徑為2um,這種情況下正沖反沖都不會(huì)造成填料的流失;此外,從柱子裝填的角度來說,裝柱時(shí)是按照與柱身箭頭相反的方向裝填的,與反沖時(shí)的液體流路方向相同,裝柱時(shí)那么高的壓力(通常大于40MPa)下用頂替液沖刷都沒有問題,難道區(qū)區(qū)1ml/min流速下的十幾個(gè)MPa會(huì)造成柱床松動(dòng)?更何況反沖時(shí)通常用的要么是90%水、要么是90%或純的有機(jī)相,...
9-2
在色譜分析域中,允許實(shí)驗(yàn)室出于提高檢測性能與效率的需要,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法或方法中規(guī)定的儀器操作條件進(jìn)行調(diào)整,但不能超出一定的規(guī)定。超出一定的調(diào)整都視為方法變動(dòng)。1、HPLC流動(dòng)相的pH值流動(dòng)相制備過程中,水溶性緩沖液pH值可在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值的±0.2pH單位范圍內(nèi)調(diào)整。2、HPLC緩沖液中鹽的濃度流動(dòng)相制備過程中,如果pH值變化滿足要求,則水溶性緩沖液中鹽濃度可在±10%范圍內(nèi)調(diào)整。3、HPLC流動(dòng)相中各組分的比例流動(dòng)相中組分的增減可以達(dá)到該組分在組成中所占...
8-31
高效液相色譜系統(tǒng)一般由高壓輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關(guān)鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、預(yù)柱或保護(hù)柱、柱溫控制器等。一、高壓輸液泵泵的種類很多,按輸液性質(zhì)可分為恒壓泵和恒流泵;恒流泵按結(jié)構(gòu)又可分為螺旋注射泵、柱塞往復(fù)泵和隔膜往復(fù)泵。恒壓泵受柱阻影響,流量不穩(wěn)定;螺旋泵缸體太大,這兩種泵已被淘汰。目前應(yīng)用最多的是柱塞往復(fù)泵。二、進(jìn)樣器高效液相色譜早期使用隔膜和停流進(jìn)樣器,裝在色譜柱入口處?,F(xiàn)在大...
8-29
氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中,例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中,但也有例外,像安捷倫的氨基柱保長期保存要保存在純乙腈中,具體哪個(gè)廠家的柱子的保存方法要看柱子的說明書,根據(jù)要求來保存。說一下氨基柱的使用注意事項(xiàng)。1.正相使用1.1新柱子可直接用流動(dòng)相。推薦先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相...
8-24
1.流動(dòng)相溶劑應(yīng)選擇HPLC的溶劑或依此為標(biāo)準(zhǔn)的溶劑。流動(dòng)相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣,清除微粒和灰塵。在送液泵內(nèi),為了防止雜物(固體)進(jìn)入流路,裝有吸濾器,但網(wǎng)孔徑為10μm,比此更小的顆粒仍然可通過,這會(huì)導(dǎo)致流路和柱子堵塞和污染。為此,建議常用0.45μm濾膜過濾。流動(dòng)相溶劑須經(jīng)脫氣,如不脫氣,在溶劑混合時(shí),或壓力溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生大量氣泡,會(huì)導(dǎo)致泵誤動(dòng)作和輸液不暢,檢測器產(chǎn)生噪聲信號(hào)等。2.流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí),流動(dòng)相在恢復(fù)到室溫前,基...
8-22
1.如何進(jìn)行色譜柱的維護(hù)?①建議檢測前樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過濾。②建議每天做完樣品后及時(shí)進(jìn)行清洗。③常規(guī)檢測:測試完后直接把色譜柱反向連接采用90%有機(jī)相沖洗45min,最后保存在純甲醇或純乙腈中。④使用緩沖鹽條件:a等度條件:使用緩沖鹽之前和之后都用過渡流動(dòng)相以1ml/min流速?zèng)_洗45min。b梯度條件:使用緩沖鹽之前與初始流動(dòng)相組成相同的過渡流動(dòng)相以1ml/min流速?zèng)_洗45min。注意:過渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相比例與分析流動(dòng)相相同比例,只是不含有緩沖鹽。緩沖鹽沖洗干凈后...
8-19
分析型等度系統(tǒng)由高壓輸液泵、檢測器、進(jìn)樣閥、溶劑托盤(瓶)、色譜柱、工作站軟件等組成;安裝、調(diào)校及使用都非常簡單。本套系統(tǒng)運(yùn)行可靠,操作方便,能夠勝任常規(guī)實(shí)驗(yàn)室的使用要求。分析型等度系統(tǒng)的特點(diǎn):優(yōu)化的輸液泵雙柱塞桿串聯(lián)設(shè)計(jì),采用凸輪驅(qū)動(dòng),懸浮式柱塞導(dǎo)向的安裝方式,數(shù)字脈動(dòng)阻尼器,使得輸液脈動(dòng)更底;步進(jìn)電機(jī)細(xì)分控制使泵運(yùn)行平穩(wěn);進(jìn)口高質(zhì)量柱塞桿和密封圈,大大提高了儀器穩(wěn)定性和耐用性。保證系統(tǒng)低故障率,安全可靠性。穩(wěn)定可靠的溶液輸送系統(tǒng),色譜泵持續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn),滿足實(shí)驗(yàn)室任何苛刻需求。優(yōu)...
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