wook500液相色譜柱技術包括填料技術和裝柱技術,填料技術自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,更多是一門藝術,需要經(jīng)驗積累。
wook500液相色譜柱尺寸的選擇
較長的色譜柱組分保留較強,運行時間較長,柱效更高,分離度效果更好。在實際工作中應綜合衡量運行時間和柱效,選擇長度適宜的色譜柱。例如含量測定、溶出檢測對于分離的要求較低,可選用較短的色譜柱,減少運行時間;有關物質(zhì)一般選擇較長的色譜柱,提高分離效果。
內(nèi)徑小的色譜柱靈敏度較高,峰型更窄,但是載樣量較小。如果載樣量滿足要求,需要更高更尖銳的峰提高靈敏度,可以選擇更小內(nèi)徑。但是如果進樣量超過了柱載樣量,色譜峰將極大變寬。所以應在靈敏度和載樣量之間綜合衡量。
粒徑小的色譜柱分離度較好,壓力更大。如果5μm粒徑的色譜柱分離度稍有不足,則同型號3μm色譜柱的分離度一般會提供令人滿意的選擇性。
如果選擇較小尺寸的色譜柱,應衡量柱外死體積對柱效的影響,柱外死體積包括連接管線、進樣體積、色譜柱接頭與色譜柱連接處的空隙等。所以一般超液相使用的色譜柱不適用于常規(guī)液相儀。小規(guī)格色譜柱使用同一品牌的儀器,減少連接處空隙引入的死體積。