色譜柱的流向不能改變色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的,標(biāo)示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動相從哪個方向流入色譜柱,那么這個流入段就是先污染端。這樣就為我們?nèi)蘸缶S護(hù)或再生色譜柱做了準(zhǔn)備,而我們需要遵循這個規(guī)定應(yīng)該在色譜柱開始做樣后。
色譜柱的說明書定要看清楚色譜柱內(nèi)保存著什么溶劑定要看清楚,因此色譜柱的說明書定要看清楚,當(dāng)然也包括說明書上建議的維護(hù)保養(yǎng)規(guī)定,對我們有用。對于反相柱來說,溶劑基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了,因為正相柱除了可以適用正相系統(tǒng),也可以適用反相系統(tǒng),因此定要看清楚,對于你的方法來說是否需要置換色譜柱內(nèi)保存溶劑。一般色譜柱不能反沖,只有色譜柱使用說明書上標(biāo)明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質(zhì)。否則,反沖色譜柱的影響是迅降柱效。
色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進(jìn)行清潔處理色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進(jìn)行清潔處理,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡;當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動相時,使用完后應(yīng)用無鹽流動相沖洗;含鹵族 元素(氟、氯、溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,不宜長期與之接觸;色譜柱如不經(jīng)常使用,應(yīng)每隔4-5天開機(jī)沖洗15分鐘。使用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱對內(nèi)填料的害是大的,尤是純水,除的色譜柱是耐水的。沖洗色譜柱好的方法是用流動相比例的水系和有機(jī)系來沖洗。如果你認(rèn)為流動相比例無法把色譜柱沖洗干凈或者此比例中有機(jī)系占有比例過大,你可以使用內(nèi)含10%左右的純水來沖洗。
保存在乙腈或甲醇中的新色譜柱可以直接使用,因保存的有機(jī)系具有揮發(fā)性,因此在使用前還是應(yīng)該用小流速的和色譜柱內(nèi)相同的溶劑沖洗一些時間。可以是0.5ml/min,120min,但建議咨詢廠家,根據(jù)色譜柱參數(shù)設(shè)定。
色譜柱應(yīng)該保存在純乙腈或甲醇中,保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或長時間。
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